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Acridine Orange (C.I.46005)
Acridine Orange est un composé organique qui sert de colorant fluorescent sélectif d'acide nucléique avec des propriétés cationiques utiles pour la détermination du cycle cellulaire. L'acridine orange est perméable aux cellules, ce qui permet au colorant d'interagir avec l'ADN par intercalation ou l'ARN par des attractions électrostatiques. Lorsqu'elle est liée à l'ADN, l'acridine orange est spectralement similaire à un composé organique connu sous le nom de fluorescéine. L'acridine orange et la fluorescéine ont une excitation maximale à 502 nm et 525 nm (vert). Lorsque l'acridine orange s'associe à l'ARN, le colorant fluorescent subit un décalage d'excitation maximal de 525 nm (vert) à 460 nm (bleu). Le décalage de l'excitation maximale produit également une émission maximale de 650 nm (rouge). Acridine Orange résiste aux environnements à pH bas, permettant au colorant fluorescent de pénétrer dans les organites acides tels que les lysosomes et les phagolysosomes qui sont des organites liées à la membrane essentiels pour l'hydrolyse acide ou pour la production de produits phagocytaires à partir de cellules apoptotiques. L'acridine orange est utilisée en microscopie à épifluorescence et en cytométrie en flux. La capacité de pénétrer dans les membranes cellulaires des organites acides et les propriétés cationiques de l'acridine orange permettent au colorant de distinguer différents types de cellules (c'est-à-dire les cellules bactériennes et les globules blancs). Le décalage des longueurs d'onde d'excitation et d'émission maximales fournit une base pour prédire la longueur d'onde que les cellules tacheront.