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Sel de sodium de fluorescéine (C.I.45350)
La fluorescéine est un composé organique et un colorant. Il est disponible sous forme de poudre orange / rouge foncé légèrement soluble dans l'eau et l'alcool. Il est largement utilisé comme traceur fluorescent pour de nombreuses applications.
La fluorescéine est un fluorophore largement utilisé en microscopie, dans un type de laser à colorant comme milieu d'amplification, en médecine légale et en sérologie pour détecter les taches de sang latentes et dans le suivi des colorants. La fluorescéine a un maximum d'absorption à 494 nm et un maximum d'émission de 512 nm (dans l'eau). Les principaux dérivés sont l'isothiocyanate de fluorescéine (FITC) et, dans la synthèse oligonucléotidique, le phosphoramidite 6-FAM.
La couleur de la solution aqueuse varie du vert à l'orange en fonction de la façon dont elle est perçue: par réflexion ou par transmission, comme on le voit dans les niveaux de bulles, par exemple, lorsque la fluorescéine est ajoutée comme colorant au remplissage d'alcool dans le tube pour améliorer la visibilité de augmenter la bulle d'air (améliorant la précision de l'instrument). Des solutions plus concentrées de fluorescéine peuvent même apparaître en rouge.
Il figure sur la liste des médicaments essentiels de l'Organisation mondiale de la santé, les médicaments les plus sûrs et les plus efficaces nécessaires dans un système de santé.
Applications
-Recherche biochimique
En biologie cellulaire, le dérivé isothiocyanate de la fluorescéine est souvent utilisé pour marquer et suivre les cellules dans les applications de microscopie à fluorescence (par exemple, cytométrie en flux). Des molécules biologiquement actives supplémentaires (telles que des anticorps) peuvent également se fixer à la fluorescéine, permettant aux biologistes de cibler le fluorophore sur des protéines ou des structures spécifiques dans les cellules. Cette application est courante dans la vue de la levure.
La fluorescéine peut également être conjuguée à des nucléosides triphosphates et incorporée enzymatiquement dans une sonde pour une hybridation in situ. L'utilisation de la fluorescéine amidite, représentée en bas à droite, permet de synthétiser des oligonucléotides marqués dans le même but. Encore une autre technique, appelée balises moléculaires, utilise des oligonucléotides synthétiques marqués à la fluorescéine. Les sondes marquées à la fluorescéine peuvent être imagées en utilisant FISH ou ciblées par des anticorps en utilisant l'immunohistochimie. Ce dernier est une alternative courante à la digoxigénine, et les deux sont utilisés ensemble pour marquer deux gènes dans un échantillon.
-Utilisation médicale
La fluorescéine sodique, le sel sodique de la fluorescéine, est largement utilisée comme outil de diagnostic dans les domaines de l'ophtalmologie et de l'optométrie, utilisant la fluorescéine topique dans le diagnostic des sécrétions cornéennes, des ulcères cornéens et des infections herpétiques de la cornée. Il est également utilisé dans un montage de lentille de contact perméable aux gaz fixes pour évaluer la couche de déchirure sous la lentille. Il est disponible sous forme de sachets stériles à usage unique avec des applicateurs en papier non pelucheux imbibés de fluorescine sodique. La fluorescéine intraveineuse ou orale est utilisée dans la recherche sur l'angiographie à la fluorescéine et pour diagnostiquer et catégoriser les troubles vasculaires, y compris la dégénérescence maculaire rétinienne, la rétinopathie diabétique, la maladie intraoculaire inflammatoire et les tumeurs intraoculaires. Il est également de plus en plus utilisé lors d'opérations de tumeurs cérébrales.
Un colorant dilué à la fluorescéine a été utilisé pour localiser de multiples anomalies septales ventriculaires musculaires pendant une chirurgie à cœur ouvert et pour confirmer la présence de tout défaut résiduel.
-Sciences de la Terre
La fluorescéine est utilisée comme traceur d'écoulement plutôt conservateur dans les essais de traceurs hydrologiques pour aider à comprendre l'écoulement de l'eau à la fois des eaux de surface et des eaux souterraines. Le colorant peut également être ajouté à l'eau de pluie dans des simulations d'essais environnementaux pour aider à localiser et analyser les fuites d'eau, et en Australie et en Nouvelle-Zélande comme alcool méthylique.
Étant donné que la solution de fluorescéine change de couleur en fonction de la concentration, elle a été utilisée comme traceur dans des expériences d'évaporation.
L'une de ses utilisations les plus reconnaissables a été dans la rivière Chicago, où la fluorescéine a été la première substance à rendre la rivière verte le jour de la Saint-Patrick en 1962. En 1966, les écologistes ont forcé le passage à un colorant végétal pour protéger la faune locale.
-Sciences végétales
La fluorescéine a souvent été utilisée pour surveiller le mouvement de l'eau dans les eaux souterraines afin d'étudier le débit d'eau et d'observer les zones de pollution ou d'obstruction dans ces systèmes. La fluorescence créée par le colorant rend les zones à problèmes plus visibles et plus faciles à identifier. Un concept similaire peut être appliqué aux plantes parce que le colorant peut rendre plus visibles les problèmes du système vasculaire de la plante. En phytologie, la fluorescéine et d'autres colorants fluorescents ont été utilisés pour suivre et étudier le système vasculaire des plantes, en particulier le xylème, la principale voie de transport de l'eau dans les plantes. En effet, la fluorescéine est mobile sur le xylème et incapable de traverser les membranes plasmiques, ce qui la rend particulièrement utile pour surveiller le mouvement de l'eau à travers le xylème. La fluorescéine peut être introduite dans les veines d'une plante par les racines ou une tige coupée. Le colorant peut être absorbé dans la plante de la même manière que l'eau et se déplace des racines vers le haut de la plante en raison d'une attraction transpiratoire. La fluorescéine incorporée dans la plante peut être visualisée sous un microscope à fluorescence
-Application sur le terrain pétrolier
Les solutions de colorant fluorescéine, généralement actives à 15%, sont souvent utilisées comme aide à la détection des fuites lors des tests hydrostatiques des oléoducs et gazoducs sous-marins et d'autres infrastructures sous-marines. Des fuites peuvent être remarquées par les plongeurs portant des rayons ultraviolets.
-Produits de beauté
La fluorescéine est également connue comme un additif de couleur (D&C Yellow n ° 7). La forme de sel disodique de la fluorescéine est connue sous le nom d'uranine ou D&C Yellow No. 8.