Fluoresceina Sodio Sale (C.I.45350)

La fluoresceina è un composto organico e colorante. È disponibile sotto forma di polvere arancione scuro / rossa leggermente solubile in acqua e alcol. È ampiamente utilizzato come tracciante fluorescente per molte applicazioni.

La fluoresceina è un fluoroforo ampiamente utilizzato in microscopia, in un tipo di laser a colorante come mezzo di guadagno, in medicina legale e sierologia per rilevare macchie di sangue latenti e nel tracciamento di coloranti. La fluoresceina ha un massimo di assorbimento a 494 nm e un massimo di emissione di 512 nm (in acqua). I principali derivati ​​sono la fluoresceina isotiocianato (FITC) e, nella sintesi degli oligonucleotidi, la fosforamidite 6-FAM.

Il colore della soluzione acquosa varia dal verde all'arancio in funzione del modo in cui viene percepito: per riflesso o per trasmissione, come si vede ad esempio nei livelli di bolla, dove la fluoresceina viene aggiunta come colorante all'alcol riempito nel tubo per migliorare la visibilità del aumentare la bolla al suo interno (migliorando la precisione dello strumento). Soluzioni più concentrate di fluoresceina possono persino apparire rosse.

È nell'elenco dei farmaci essenziali dell'Organizzazione mondiale della sanità, i farmaci più sicuri ed efficaci necessari in un sistema sanitario.

Applicazioni

-Ricerca biochimica

Nella biologia cellulare, il derivato isotiocianato della fluoresceina viene spesso utilizzato per etichettare e tracciare le cellule nelle applicazioni di microscopia a fluorescenza (ad esempio, citometria a flusso). Ulteriori molecole biologicamente attive (come gli anticorpi) possono anche legarsi alla fluoresceina, consentendo ai biologi di indirizzare il fluoroforo a specifiche proteine ​​o strutture nelle cellule. Questa applicazione è comune nella visualizzazione del lievito.

La fluoresceina può anche essere coniugata a trifosfati nucleosidici e incorporata enzimaticamente in una sonda per l'ibridazione in situ. L'uso della fluoresceina ammidite, mostrato in basso a destra, consente di sintetizzare oligonucleotidi marcati per lo stesso scopo. Un'altra tecnica ancora, chiamata fari molecolari, utilizza oligonucleotidi sintetici marcati con fluoresceina. Le sonde marcate con fluoresceina possono essere sottoposte a imaging utilizzando FISH o mirate da anticorpi mediante immunoistochimica. Quest'ultima è un'alternativa comune alla digossigenina e le due vengono utilizzate insieme per etichettare due geni in un campione.

-Uso medico

La fluoresceina sodica, il sale sodico della fluoresceina, è ampiamente utilizzata come strumento diagnostico nei campi dell'oftalmologia e dell'optometria, utilizzando la fluoresceina topica nella diagnosi delle secrezioni corneali, ulcere corneali e infezioni corneali erpetiche. Viene anche utilizzato in un raccordo per lenti a contatto permeabili ai gas fisse per valutare lo strato lacrimale sotto la lente. È disponibile in bustine sterili monouso con applicatori di carta privi di lanugine imbevuti di fluorescina di sodio. La fluoresceina per via endovenosa o orale viene utilizzata nella ricerca con fluoresceina angiografia e per diagnosticare e classificare condizioni vascolari tra cui degenerazione maculare retinica, retinopatia diabetica, malattia infiammatoria intraoculare e tumori intraoculari. Inoltre è sempre più utilizzato durante gli interventi chirurgici per i tumori cerebrali.

Il colorante diluito con fluoresceina è stato utilizzato per localizzare più difetti del setto ventricolare muscolare durante la chirurgia a cuore aperto e per confermare la presenza di eventuali difetti residui.

-Scienze della Terra

La fluoresceina viene utilizzata come tracciante di flusso piuttosto conservativo nei test del tracciante idrologico per aiutare a comprendere il flusso dell'acqua sia delle acque superficiali che delle acque sotterranee. Il colorante può anche essere aggiunto all'acqua piovana nelle simulazioni di test ambientali per facilitare l'ubicazione e l'analisi delle perdite d'acqua e in Australia e Nuova Zelanda come spirito metilato con alcol metilico.

Poiché la soluzione di fluoresceina cambia colore a seconda della concentrazione, è stata utilizzata come tracciante negli esperimenti di evaporazione.

Uno dei suoi usi più riconoscibili era nel fiume Chicago, dove la fluoresceina è stata la prima sostanza a rendere il fiume verde il giorno di San Patrizio nel 1962. Nel 1966, gli ambientalisti costrinsero a cambiare una tintura a base vegetale per proteggere la fauna locale.

-Scienza delle piante

La fluoresceina è stata spesso utilizzata per monitorare il movimento dell'acqua nelle acque sotterranee per studiare il flusso dell'acqua e per osservare le aree di inquinamento o ostruzione in questi sistemi. La fluorescenza creata dal colorante rende le aree problematiche più visibili e più facili da identificare. Un concetto simile può essere applicato alle piante perché la tintura può rendere più visibili i problemi nel sistema vascolare della pianta. Nella scienza delle piante, la fluoresceina e altri coloranti fluorescenti sono stati utilizzati per monitorare e studiare la vascolarizzazione delle piante, in particolare lo xilema, il principale percorso di trasporto dell'acqua nelle piante. Questo perché la fluoresceina è mobile xilematica e non è in grado di attraversare le membrane plasmatiche, il che la rende particolarmente utile nel monitoraggio del movimento dell'acqua attraverso lo xilema. La fluoresceina può essere introdotta nelle vene di una pianta attraverso le radici o uno stelo tagliato. Il colorante può essere assorbito nella pianta allo stesso modo dell'acqua e si sposta dalle radici alla sommità della pianta a causa di un'attrazione traspirante. La fluoresceina incorporata nella pianta può essere visualizzata al microscopio a fluorescenza

-Applicazione sul campo dell'olio

Le soluzioni coloranti alla fluoresceina, in genere attive al 15%, vengono spesso utilizzate come ausilio per il rilevamento delle perdite durante i test idrostatici di oleodotti sottomarini e gasdotti e altre infrastrutture sottomarine. Le perdite possono essere notate dai subacquei che indossano la luce ultravioletta.

-Cosmetici

La fluoresceina è anche nota come additivo colorante (D&C Yellow no. 7). La forma di sale disodico della fluoresceina è nota come uranina o D&C Yellow No. 8.