Tripsina

La tripsina è una peptidasi del succo pancreatico coinvolta nella digestione delle proteine. È una serina proteasi che idrolizza i legami peptidici situati sul lato C di un residuo di lisina o arginina, che sono amminoacidi basici.

La tripsina si trova nella maggior parte degli animali. Questo enzima è ampiamente utilizzato per approcci di ricerca proteomica, in particolare per la caratterizzazione e il sequenziamento delle proteine. Pertanto, viene utilizzato principalmente nella spettrometria di massa per digerire le proteine ​​prima dell'analisi.

La tripsina viene utilizzata nella coltura cellulare per rilasciare cellule che aderiscono a fiasche di coltura o piastre di Petri. In effetti, la tripsina scinde le proteine ​​della membrana di adesione e le cellule si trovano quindi in sospensione. Questa "tripsinizzazione" viene utilizzata quotidianamente per mantenere le colture cellulari (passando a un pallone di coltura più grande o moltiplicando i matracci), per contare le cellule mediante citometria a flusso o per eseguire altre analisi. Tuttavia, questo trattamento colpisce un po 'le cellule (vitalità, marker di membrana), quindi l'azione della tripsina deve essere limitata: viene eliminata lavando le cellule, inoltre viene inibita dall'aggiunta di siero fetale di proteine ​​di membrana) o un inibitore specifico 2. In alternativa, vengono utilizzati altri enzimi3.

La tripsina viene utilizzata anche in immunoematologia per la rilevazione di anticorpi irregolari o addirittura durante la costituzione di un cariotipo: ad esempio, idrolizzando gli istoni, e in combinazione con la colorazione di Giemsa, permette la comparsa di bande G sul DNA e quindi la precisa identificazione dei cromosomi. In questo modo è possibile rilevare un'anomalia cromosomica.

-Sintesi

Viene sintetizzato dal pancreas come tripsinogeno (proenzima inattivo) e quindi immagazzinato nelle vescicole enzimatiche delle cellule acinose da cui viene secreto durante la digestione. L'attivazione del tripsinogeno in tripsina deriva dall'idrolisi del propeptide sotto l'influenza di enterokinase o da un effetto autoattivante della tripsina. La colecistochinina pancreozina attiva la secrezione di enzimi (cioè tripsina) nel succo pancreatico.